Thermo Scientific Maxima H Minus First Strand cDNA Synthesis Kit, доступный с dsDNase или без него, представляет собой готовую систему для высокоэффективного синтеза первой цепи кДНК. В наборе используется Maxima H Minus Reverse Transcriptase (RT) – усовершенствованный фермент, полученный путем in vitro эволюции MMLV RT. Фермент обладает самой высокой термостабильностью среди производных MMLV RT и не имеет активности РНКазы H.

Этот набор позволяет синтезировать длинные кДНК до 20 kb при повышенных температурах (до 65°C), превосходя возможности других систем по производству полноразмерной кДНК. Благодаря повышенной скорости синтеза реакция может быть завершена за 30 минут. Для обратной транскрипции в наборе используется Maxima H Minus Reverse Transcriptase (RT) – усовершенствованный фермент, полученный путем in vitro эволюции MMLV RT.

Набор Maxima H Minus First Strand cDNA Synthesis Kit с dsDNase обеспечивает значительно упрощенный рабочий процесс, который объединяет удаление геномной ДНК и синтез кДНК в одну пробирку. Набор содержит новый двухцепочечно-специфический DNase (dsDNase), разработанный для удаления контаминирующей геномной ДНК из препаратов РНК за две минуты без ущерба для качества или количества РНК. Высокоспецифическая активность dsDNase в отношении двухцепочечной ДНК гарантирует, что одноцепочечная ДНК (такая как кДНК и праймеры) не расщепляется, и обработанную dsDNase РНК можно непосредственно добавлять к обратной транскрипции.

Особенности набора Maxima H Minus First Strand cDNA Synthesis Kit:

• Повышенные температуры реакции – первая цепь кДНК может быть синтезирована в диапазоне температур 42–65°C
• Высокие выходы полноразмерной первой цепи кДНК – с матрицами РНК до 20 kb
• Гибкое праймирование – oligo(dT)18, случайные гексамеры или ген-специфичные праймеры
• Интегрированный этап удаления геномной ДНК с помощью набора dsDNase

Применение

• Синтез первой цепи кДНК для RT-PCR
• Создание библиотек кДНК
• Получение зондов для гибридизации
• Синтез антисмысловой РНК

Состав

• Maxima H Minus Enzyme Mix
• Праймеры Oligo(dT)18 и случайные гексамеры
• 5X RT Buffer
• dNTP Mix
• Вода, свободная от нуклеаз

Набор First Strand Synthesis Kit с dsDNase также содержит:

• dsDNase и 10X dsDNase Buffer

Дополнительная информация о компонентах реакции

• Maxima H Minus Enzyme Mix содержит Maxima H Minus Reverse Transcriptase и RiboLock RNase Inhibitor. RiboLock RNase Inhibitor эффективно защищает матрицы РНК от деградации РНКазами A, B и C при температурах до 55°C.
• Oligo(dT)18 и случайные гексамерные праймеры поставляются с набором. Случайные гексамерные праймеры связываются неспецифически и используются для синтеза кДНК из всех РНК в популяции тотальной РНК. Праймер oligo(dT)18 селективно отжигается на 3'-конце poly(A) РНК, синтезируя кДНК только из poly(A) хвостовой мРНК. Ген-специфичные праймеры также могут быть использованы с набором для праймирования синтеза из определенной последовательности.
• 10 mM dNTP Mix – это предварительно смешанный водный раствор dATP, dTTP, dCTP и dGTP.
• Вода, свободная от нуклеаз, предоставляется для постановки реакции и разведения образца ДНК. Отсутствие эндо-, экзодезоксирибонуклеаз, рибонуклеаз и фосфатаз подтверждено соответствующими тестами качества.

Только для исследовательского использования. Не для использования в диагностических процедурах.