Набор Pierce™ Chromogenic Endotoxin Quant Kit – это высокочувствительный метод для количественного определения эндотоксинов, основанный на использовании лизата амебоцитов. Он позволяет точно измерять и обнаруживать эндотоксины в различных образцах, таких как белки, пептиды, нуклеиновые кислоты (ДНК или РНК), вакцины или антитела.

Преимущества набора для количественного определения эндотоксинов Pierce™ Chromogenic:

• Высокая чувствительность: обнаруживает эндотоксины в концентрациях от 0,01 EU/мл до 1 EU/мл.
• Специфичность: не взаимодействует с ß-глюканами и подходит для анализа широкого спектра образцов, включая плазму, белки, вакцины, плазмиды или нуклеиновые кислоты (ДНК и РНК).
• Быстрота: проведение анализа занимает всего 20 минут.

Данный набор использует лизаты амебоцитов Limulus (LAL), полученные из крови мечехвоста (Limulus polyphemus), для точного измерения и обнаружения эндотоксинов. Обнаружение эндотоксинов возможно в плазме, белках, пептидах, нуклеиновых кислотах или антителах. Набор позволяет проводить измерения в диапазоне чувствительности от 0,01 до 1,0 EU/мл*, используя стандартный спектрофотометр или ридер для планшетов при длине волны 405–410 нм. Гибкость набора позволяет анализировать образцы как в низком диапазоне (0,01–0,1 EU/мл), так и в высоком (0,1–1,0 EU/мл), в зависимости от ваших исследовательских задач.

Метод, используемый в наборе, основан на взаимодействии эндотоксина с проферментом Фактором C, содержащимся в циркулирующих амебоцитах мечехвоста. В присутствии ЛПС протеолитическая активность этого профермента активируется. Уровень эндотоксинов определяется путем измерения активности Фактора C в присутствии бесцветного хромогенного синтетического пептидного субстрата (Ac-Ile-Glu-Ala-Arg-pNA), который высвобождает p-нитроанилин (pNA) после протеолиза, образуя желтую окраску, которую можно измерить при абсорбции 405 нм. Интенсивность окраски прямо пропорциональна количеству эндотоксина в образце и рассчитывается с использованием стандартной кривой, построенной на основе известного количества эндотоксина. Этот анализ стал отраслевым стандартом для обнаружения эндотоксинов в фармацевтике, медицинских устройствах, при тестировании пищевых продуктов и воды, а также в медико-биологических исследованиях.

*Одна единица эндотоксина/мл (EU/мл) эквивалентна примерно 0,1 нг эндотоксина/мл раствора.