1 Kb Plus ДНК-маркер: точное определение размера фрагментов ДНК

Последовательности ДНК и РНК-маркеров Invitrogen являются собственностью компании.

ДНК-маркеры Invitrogen содержат линейные фрагменты двуцепочечной ДНК.

ДНК-лестницы Invitrogen состоят только из двухцепочечных фрагментов ДНК.

Это может произойти, если маркер был нагрет. Пожалуйста, убедитесь, что лестницы не нагреваются перед использованием.

Вот несколько причин, по которым вы можете видеть размытие полос:

- ДНК была деградирована. Избегайте загрязнения ДНК-стандартов нуклеазами.
- На гель нанесено слишком много ДНК. Уменьшите количество ДНК в геле.
- ДНК была загрязнена белком. Удалите белки экстракцией фенолом перед электрофорезом.
- Для небольших фрагментов ДНК полосы могли диффундировать во время окрашивания. Добавьте бромистый этидий перед электрофорезом.
- Для радиоактивно меченной ДНК, мечение проводилось с помощью ник-трансляции. Метьте ДНК путем замещающего синтеза с помощью ДНК-полимеразы T4 или метьте 5'-конец с помощью полинуклеотидкиназы T4.
- Были использованы неправильные условия электрофореза. Не допускайте превышения напряжения ~20 В/см. Поддерживайте температуру <30°C во время электрофореза. Убедитесь, что используемый буфер для электрофореза имеет достаточную буферную емкость.
- ДНК содержала слишком много соли. Удалите избыток соли осаждением этанолом перед электрофорезом.

ДНК-маркеры TrackIt содержат два трекинг-красителя в буферах для образцов, которые служат визуальными маркерами для отслеживания прогресса электрофореза в геле, а также указывают на достижение максимального разрешения. Трекинг-красители не должны мешать визуализации ДНК-полос в маркере, так как красители проходят за пределами большинства ДНК-полос в маркере.

Буфер для загрузки TrackIt Cyan/Orange содержит уникальные трекинг-красители, Xylene Cyanol FF и Orange G. Мы рекомендуем буфер для загрузки TrackIt Cyan/Orange для фрагментов ДНК размером от 10 п.н. до 1 т.п.н.

Буфер для загрузки TrackIt Cyan/Yellow содержит уникальные трекинг-красители, Xylene Cyanol FF и Tartrazine. Мы рекомендуем буфер для загрузки TrackIt Cyan/Yellow для фрагментов ДНК размером от 100 п.н. до 10 т.п.н. Молекулярные массы: Xylene Cyanol FF, 638,6; Orange G, 452,4; Tartrazine, 534,4.

Примечание: ДНК-маркеры TrackIt не рекомендуются для использования с полиакриламидными гелями и не предназначены для количественного определения.

Вот несколько предложений:

В общем, существует очень мало причин, по которым ДНК-маркер может мигрировать аномально. Вот несколько предложений:

Есть несколько возможных причин этого:

Слабые или отсутствующие ДНК-маркеры могут быть вызваны:

(1) Неправильная концентрация ДНК-лестницы приводит к плохому разделению и размытию полос ДНК.
(2) Образцы, содержащие ≥50 мМ NaCl, 100 мМ KCl, 10 мМ ацетат-ионов или 10 мМ EDTA (например, некоторые буферы для рестрикционных ферментов и ПЦР), вызовут потерю разрешения на агарозных гелях E-Gel.

Для мечения ДНК-лестницы 100 п.н., ДНК-лестницы 1 т.п.н. Плюс и ДНК-лестницы для определения массы можно использовать ДНК-полимеразу T4 или полинуклеотидкиназу T4.