Invitrogen SuperScript™ IV Template-Switching RT Master Mix разработан для достижения высокой эффективности переключения шаблонов в реакциях синтеза кДНК. Он содержит обратную транскриптазу SuperScript™ IV, ингибитор РНКазы и все остальные компоненты реакции обратной транскрипции в удобном предварительно смешанном формате. Необходимо добавить только матрицу РНК, праймер обратной транскрипции и олиго (TSO) для переключения шаблонов по выбору.

Особенности SuperScript™ IV Template-Switching RT Master Mix:

• Разработан для высококачественного синтеза полноразмерной кДНК
• Содержит запатентованный усилитель для максимального увеличения эффективности переключения шаблонов
• Исключительная чувствительность для легкого обнаружения целей с низкой концентрацией (всего одна клетка или 2 пг общей РНК)
• Включен буфер для лизиса клеток для прямого синтеза кДНК без очистки РНК

Обзор процедуры

Чтобы максимизировать эффективность переключения шаблонов, SuperScript™ IV Template-Switching RT Master Mix содержит запатентованный усилитель переключения шаблонов и использует активность терминальной дезоксинуклеотидилтрансферазы (TdT) обратной транскриптазы SuperScript™ IV. Когда обратная транскриптаза достигает 5'-конца матрицы РНК, активность TdT добавляет 1–3 дополнительных нуклеотида к концу кДНК, что обеспечивает связывание олиго переключения шаблонов и включение известной последовательности на 3'-конце результирующей кДНК. Эту кДНК можно использовать для амплификации с помощью ПЦР, анализа экспрессии генов с помощью ПЦР в реальном времени или в качестве матрицы для 5'-RACE, RNA-seq или синтеза второй цепи кДНК.

Этот мастер-микс совместим с широким диапазоном входного количества общей РНК (от 2 пг до 4 мкг) и поставляется с буфером для лизиса, позволяющим осуществлять прямой синтез кДНК из клеток млекопитающих (1–1000 клеток на образец).

Сопутствующие продукты

SuperScript™ IV Template-Switching RT Master Mix совместим с различными праймерами обратной транскрипции и самостоятельно разработанными олиго для переключения шаблонов. Мы предлагаем олиго для переключения шаблонов и праймер захвата олиго (dT), оба содержат одну и ту же адапторную последовательность, комплементарную праймеру для предварительной амплификации. Альтернативно, полный набор реагентов для синтеза кДНК с переключением шаблонов и предварительной амплификации доступен в наборе SuperScript™ IV Single Cell/Low-Input cDNA PreAmp.

Только для исследовательских целей. Не для использования в диагностических процедурах.